کروماتوگرافی مایع چیست؟

کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا hplc )  High-performance liquid chromatography ) از تکنیک‌های جداسازی رایج در بسیاری از علوم می باشد.

کروماتوگرافی مایع روشی برای تجزیه و تحلیل آزمایشگاهی یک مخلوط است.

این روش یک نوع کارآمد کروماتوگرافی است که برای هدایت نمونه مخلوط از طریق یک ستون ، به جای استفاده از نیروی جاذبه ، از فشار بالا استفاده می کند.

یک نمونه تزریق می شود ، سپس پمپ حاوی مقدار زیادی فشار به حرکت نمونه در امتداد یک ستون بسته بندی شده کمک می کند ، جایی که آن را به اجزای جداگانه جدا می کند.

این جداسازی سپس توسط یک آشکارساز مورد تجزیه و تحلیل قرار می گیرد تا به نتیجه برسد.

خرید آب hplc گرید از فروشگاه شیمی رو

water HPLC C115333

اجزاء و قسمت‌های اصلی دستگاه HPLC

1- مخازن حلال HPLC :

که در آنها فاز متحرک و یا حلال‌های شستشودهنده ستون ریخته شده است.

2-سایت تزریق (Injection Site)

به منظور تزریق به HPLC ، ابتدا باید یک نمونه در یک حلال مایع قطبی حل شود ، ترجیحاً یکی با طیف های شناخته شده کروماتوگرافی،  تا داده های آن از نمونه متمایز شود.

محلول مایع حاوی نمونه در دستگاه قرار می گیرد و به داخل ستون ارسال می شود. محل واقعی محل تزریق به مارک ابزار بستگی دارد.

در بیشتر موارد ، فرآیند تزریق به صورت خودکار انجام می شود ، اما در برخی موارد یک کارشناس آزمایشگاه باید نمونه را با استفاده از یک سوزن سرنگ کوچک تزریق کند.

دستگاه HPLC

3-پمپ (Pump Component)

  پمپ جز ضروری HPLC است زیرا فشاری را فراهم می کند که نمونه را از طریق ستون عبور می دهد.

مقاومت پمپ متفاوت است ، اما یک فشار قوی می تواند تا 6000 پوند بر اینچ مربع فشار ایجاد کند که پس از تزریق نمونه اعمال می شود.

این روش اجازه می دهد تا نمونه با سرعت و کارآیی بیشتری از ستون عبور کند تا اینکه فقط از نیروی جاذبه استفاده شود.

4-شرح ستون (Column Description)

افزایش سرعت نمونه ای که توسط یک پمپ از ستون عبور داده می شود ، می تواند نوع دیگری از ستون را از آنچه در کروماتوگرافی مایع ساده استفاده می شود ، استفاده کند.

مواد بسته بندی در ستون می توانند اندازه ذرات بسیار کمتری داشته باشند، که باعث افزایش سطح می شود و بنابراین به تعاملات نمونه با ستون کمک می کند.

بیشتر ستون های کروماتوگرافی مایع از طریق قطبیت کار می کنند. نمونه در یک حلال قطبی حل می شود و ستون از هیدروکربن های عمدتا غیر قطبی تشکیل شده است.

قسمتهای قطبی مولکول نمونه خیلی سریع از ستون عبور می کنند زیرا در درجه اول با حلال برهم کنش دارند.

در حالی که اجزای غیر قطبی نمونه در ستون باقی مانده و تعاملات ضعیفی با اجزای ستون ایجاد می کنند.

 بنابراین ، اجزای نمونه به ترتیب از بیشتر قطبی به غیر قطبی از ستون خارج می شوند.

خرید متانول hplc  گرید از فروشگاه شیمی رو

Methanol C106007 HPLC

5-عملکرد آشکارساز (Detector Function)

•  غیرتخریبی بودن:  در طول روند شناسایی، نمونه را تخریب نکند.
•  حساسیت بالا
•  پاسخ خطی به غلظت در دامنه وسیع (برای سهولت در محاسبات)

آشکارسازها نیز بر اساس نوع ابزارکروماتوگرافی مایع  مورد استفاده متفاوت هستند.

با این حال ، بیشتر عملکردها به همان روش اساسی است.

منبع نور ماورا  بنفش هنگام خارج شدن از ستون ، به اجزای نمونه جدا شده می تابد.

اکثر ترکیبات آلی مقدار مشخصی از نور را جذب می کنند ، بنابراین با عبور از کنار پرتوی نور اعمال شده ، یک آشکارساز می تواند مقدار نور را جذب کند.

آشکارساز همچنین زمان نگهداری اجزا را بر اساس ترتیب خارج شدن از ستون ثبت می کند.

سپس می توان این خروجی را بر اساس سطح اوج تجزیه و تحلیل کرد تا ماهیت دقیق اجزای نمونه تعیین شود.

برای خرید حلال های Hplc گرید می توانید به فروشگاه شیمی رو مراجعه کنید و حلال مورد نظر خود را در کوتاه ترین زمان تهیه کنید.